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생명체 복제란? 목록

체세포 복제는 세포 기능의 분화가 이미 완료된 체세포를 분화
이전의 상태로 되돌리는 리프로그래밍(Re-programming) 과정이
다. 복제양 「돌리」가 태어나기 전까지는 동물의 복제는 생식
세포를 통해서만 가능한 것으로 인식되어 왔었다. 복제 대상 동
물의 체세포를 떼어내 핵을 제거한 난자와 융합하는 방법으로
수정란을 만들어 대리모의 자궁에 착상하는 것이다. 따라서 복
제를 통해 태어나는 동물은 체세포를 제공한 동물과 유전정보
가 같다.

-핵을 이식받게 되는 난자 준비
핵이 제거된 성숙한 난자를 확보하는 과정이다. 이 탈핵 과정
은 복제과정 중 가장 먼저 이루어지며 일반적으로 특정 약물
(cytoskeletal inhibitor인 cytochalasin B)로 난자를 처리하
여 세포골격에 의한 세포질의 파괴를 억제한 후 미세 조작에 의
해 이루어진다. 소의 경우는 체외성숙 기술이 보편화되어 체외
성숙 난자를 이용하고 있으나 돼지는 현재까지 체외성숙 난자
의 발육능이 저조한 점을 이유로 체내성숙 난자가 이용되기도
한다. 최근에는 탈핵을 간편하게 하고 핵이식의 효율을 증진시
키기 위해 난자의 투명대를 절개 후 곧바로 눌러 짜(sqeezing)
극체 및 주변 세포질을 제거하는 방법이 도입되었다.

-공여핵 추출과 준비
체세포를 공여핵으로 이용할 경우에는 세포를 역분화
(dedifferentiation)시켜야 한다. 이미 분화된 세포의 세포시계
를 되돌려(reprogramming) 분열 및 분화가 정지된 상태
(quiescence)인 G0기로 조절해 놓아야 이 세포핵을 가지고 핵이
식이 가능하다. 이 과정은 체세포를 영양이 부족한 상태에서 배
양하여(혈청농도의 점점 줄임: serum starvation) 이루어진다.

-핵 이식
공여핵을 난자 안으로 이식하는 방법은 크게 세포융합(cell
fusion)과 세포질내 직접주입법(intracytoplasmic cell
injection; ICCI)으로 나눈다. 세포를 융합시키는 기술로는 간
편하고 재현성이 우수한 전기자극법이 보편적이다. 세포질내 직
접주입법은 미세관을 사용하여 현미경 하에서 공여핵을 수핵난
자 내에 직접 주입하는 방법이다. 이는 공여핵의 크기가 작아
융합이 어려운 경우에 시도하고 있다.

-난자활성화와 리모델링
일반적으로 동물의 체내에서 난자와 정자가 융합되면 수정된 난
자는 활성화되면서 분열을 시작하게 된다. 이 과정은 핵을 이식
한 난자를 여러 가지 방법으로 처리하여 이와 비슷한 현상을 보
이도록 자극하는 것이다. 난자를 인위적으로 활성화하기 위하
여 전기자극법, Ca-ionophore(A23187)라는 종류의 약물과 단백
질합성억제제의 병행처리법 등이 전통적으로 사용되어 왔다. 전
기자극법은 난자의 활성화가 전기적 세포융합과 동시에 이루어
질 수 있기 때문에 간편하지만 현재는 Ca-ionophore 계열의
ionomycin과 인산화억제제인 6-DMAP를 사용해서 융합후 활성화
가 일반적으로 적용된다. 한편 분열촉진인자(MPF) 수준이 높은
상황에서 융합된 외래 핵은 일시적으로 핵막이 붕괴하고 염색체
가 응축되는데 이런 과정을 리모델링이라 한다. 최근에는 융합
후 일정 시간이 흐른 뒤 화학적 또는 전기적 방법으로 리모델링
을 유도한 핵이식란이 우수한 발육률을 보여 융합 후 일정 시
간 동안 높은 MPF 수준을 유지하여 리모델링을 거치는 것이 이
식된 핵의 재프로그래밍에 유효할 지도 모른다는 주장이 제기되
고 있다.

-재프로그래밍(reprogramming)
재프로그래밍이란 핵이식란이 일반적인 수정란처럼 분할 및 발
육에 적응하는 과정을 뜻한다. 이 과정을 통해 핵이식란은 정상
적인 수정란과 마찬가지의 발달 양상을 보이게 된다.

-체외배양 및 수정란 이식
핵이식란의 배양 및 수정란 이식은 체외수정란의 배양이나 이식
과 동일한 방법이 사용된다.


야후! 지식검색 ejim314님의 글에서 발췌했습니다.

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